在微生物工作中，菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作，這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種，防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對接種工作干擾很大。而無菌室的存在對于菌種的保護(hù)起到了很好的作用，減少了污染情況，所以無菌室也稱接種室，是系統(tǒng)接種、純化菌種等無菌操作的專用實(shí)驗(yàn)室。

一、無菌實(shí)驗(yàn)室裝修設(shè)計(jì)細(xì)節(jié)

根據(jù)經(jīng)濟(jì)和科學(xué)的角度來講，無菌實(shí)驗(yàn)室裝修的基本要求如下：

（1）門應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置上，內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門，以減少空氣的波動(dòng)；外間的門最好也用拉門，要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上。

（2）無菌實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)應(yīng)有內(nèi)、外兩間，內(nèi)間是無菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過大，以便于空氣滅菌。內(nèi)間面積2×2.5＝5m2，外間面積1×2＝2m2，

高以2.5m以下為宜，都應(yīng)有天花板。

（3）無菌實(shí)驗(yàn)室容積小而嚴(yán)密，使用一段時(shí)間后，室內(nèi)溫度很高，故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上（即離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置），最好為雙層結(jié)構(gòu)，外層為百葉窗，內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)飾使用后、滅菌前開啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī)。

（4）在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上，應(yīng)開一個(gè)小窗，作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道，以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù)，降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內(nèi)外都掛對拉的窗扇。

二、無菌實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)

1．實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(tái)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。

2．小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

3．工作人員應(yīng)注意自身之安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壷疅o菌操作臺(tái)(至少ClassII)。操作過程中，應(yīng)避免引起氣溶膠類物質(zhì)的產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等。

4．接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。

5．無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%的酒精擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之中央無菌區(qū)域，勿在邊緣的非無菌區(qū)域操作。

6．使用無菌瓶內(nèi)的溶液是，不可將無菌敷料堵塞瓶口傾倒無菌溶液，或直接伸入溶液瓶內(nèi)蘸取，以免污染剩余的溶液。

7．每次操作過程中，均應(yīng)做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。

8．如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí)，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

9．無菌包內(nèi)物品不慎污染或無菌包浸濕，外界微生物可滲入包內(nèi)，造成污染，需重新消毒。

10．凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。

11．吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

12．帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒，24小時(shí)后取出沖洗。

13．戴手套時(shí)應(yīng)注意未戴手套的手不可觸及手套外面，而戴手套的手則不可觸及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如發(fā)現(xiàn)破裂，應(yīng)立即更換。脫手套時(shí)，須將手套口翻轉(zhuǎn)膠下，不可用力強(qiáng)拉手套邊緣或手指部分，以免損壞。

14．實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后。