組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與其他一般實(shí)驗(yàn)室工作的主要區(qū)別在于要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境要求也有所不同，今天為大家介紹植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的常用儀器配置清單和實(shí)驗(yàn)室的基本操作。
一、植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)成
組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室布局的總體要求：便于隔離、便于操作、便于滅菌、便于觀察
完整的組織培養(yǎng)室通常包括洗滌室、準(zhǔn)備室（化學(xué)實(shí)驗(yàn)室）、接種室（無菌操作室）、培養(yǎng)室、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室等部分。可以根據(jù)實(shí)際需要和條件進(jìn)行設(shè)計(jì)。
但從功能上至少包括準(zhǔn)備室(化學(xué)實(shí)驗(yàn)室)、接種室以及培養(yǎng)室三部分，并且按順序排列。在準(zhǔn)備室與接種室之間應(yīng)留有緩沖空間（或建立緩沖室）。
一）準(zhǔn)備室(化學(xué)實(shí)驗(yàn)室)
1、主要功能
用于培養(yǎng)器皿的清洗、干燥、培養(yǎng)基的配制、分裝和滅菌、試管苗的出瓶及整理等工作。
2、主要儀器設(shè)備及用品
（1）藥品柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、水槽
（2）超聲波清洗儀
（3）涼干架
（4）干燥箱
（5）各種玻璃器皿(燒杯、量筒、容量瓶、試劑瓶、三角瓶等)
（6）蒸餾水制造裝置
（7）天平（萬分之一、百分之一）
（8）移液器
（9）pH計(jì)（不同范圍pH試紙）
（10）水浴鍋
（11）微波爐
（12）電爐
（13）磁力攪拌器
（14）蠕動(dòng)泵及培養(yǎng)基分裝用品
（15）高壓滅菌鍋
（16）冰箱
2）接種室（無菌操作室)
1、功能
接種材料的滅菌、接種以及培養(yǎng)物的繼代轉(zhuǎn)接等。
接種室要求保持潔凈，與化學(xué)實(shí)驗(yàn)室之間應(yīng)設(shè)置緩沖室。
2、主要儀器設(shè)備及用品
（1）超凈工作臺(tái)
（2）紫外燈
（3）小推車
（4）擱架
（5）瓷盤
（6）接種工具
各種鑷子、解剖刀、手術(shù)剪、普通剪刀、接種針、酒精燈、手持噴霧器、細(xì)菌過濾器等。
三）培養(yǎng)室
1、功能
主要用于植物材料的培養(yǎng)。
要求室內(nèi)潔凈并能保持一定的溫度、光照以及濕度，以促進(jìn)植物材料的生長(zhǎng)和分化。
2、主要儀器設(shè)備及用品
（1）培養(yǎng)架及燈管
（2）搖床（振蕩器)
（3）空調(diào)
（4）自動(dòng)定時(shí)器
（5）加濕及除濕器
（6）光照培養(yǎng)箱
四）細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室
1、功能
主要用于培養(yǎng)材料的顯微觀察及照相等。
2、主要儀式設(shè)備及用品
體視顯微鏡、普通顯微鏡、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡、配套顯微照相裝置、普通相機(jī)或數(shù)碼相機(jī)、切片機(jī)及配套制片及染色用品等。
體視顯微鏡用途：放大倍數(shù)5~80倍主要用于植物形態(tài)分化的觀察、莖尖的切取。
普通光學(xué)顯微鏡用途：用于植物切片觀察，確定植物的發(fā)育進(jìn)程，如:不定芽、不定胚的分化過程以及其它器官組織的分化等。
倒置顯微鏡用途：主要用于細(xì)胞、原生質(zhì)體的細(xì)胞分裂和細(xì)胞團(tuán)形成的觀察。
二、實(shí)驗(yàn)室基本操作
一）洗滌
1、普通器皿∶采用洗衣粉、洗潔精等中性洗滌劑洗滌。
2、難清洗器皿及移液管等∶用水清洗后再用重鉻酸鉀洗液浸泡，最后清水沖洗，或用超聲波儀清洗。
二）滅菌
滅菌是指用物理和化學(xué)方法殺死物體表面和內(nèi)部的所有微生物（包括芽胞） , 使之呈無菌狀態(tài)。經(jīng)過滅菌的物品稱“無菌物品”。
1、器具滅菌：培養(yǎng)皿、解剖刀、鑷子等用品。
（1）干熱滅菌：鋁箔包好后，放于恒溫干燥箱內(nèi)，150℃保溫2小時(shí)，成本較高。
（2）高壓蒸汽滅菌：高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)120℃ 15-20 分鐘。
（3）灼燒滅菌：接種時(shí)，解剖刀及鑷子等浸入95%乙醇，然后取出在酒精燈火焰上灼燒殺菌。
2、培養(yǎng)基滅菌
采用高壓蒸汽滅菌。120℃ 15-20分鐘。
培養(yǎng)基體積越大，滅菌時(shí)間越長(zhǎng)。
3、不耐高溫材料的滅菌
采用過濾滅菌，如IAA、ZT、天然有機(jī)添加物等。
4、外植體的表面滅菌
（1）流水沖洗10-20分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間
（2）70-75%酒精中浸泡30秒
（3）0.1%-0.2%氯化汞液中浸泡10分鐘左右 或 在10%的次氯酸鈉、飽和漂泊粉浸泡30分鐘左右
（4）蒸餾水沖洗4-5次
（5）備用
三）無菌操作
實(shí)驗(yàn)員消毒、實(shí)驗(yàn)室、無菌臺(tái)滅菌→實(shí)驗(yàn)器材滅菌→無菌接種→消毒→實(shí)驗(yàn)臺(tái)衛(wèi)生→培養(yǎng)室培養(yǎng)
1、消毒，更換實(shí)驗(yàn)服、帽子與鞋子，進(jìn)入接種室。
2、打開超凈工作臺(tái)和無菌操作室的紫外燈，照射40min左右，后關(guān)閉。
3、開啟過濾室風(fēng)機(jī)，使無菌風(fēng)吹拂工作臺(tái)面和四周的臺(tái)壁。
4、用70%-75%的酒精擦拭工作臺(tái)和雙手。
5、用沾有70%-75%的酒精的紗布擦拭盛培養(yǎng)基的培養(yǎng)器皿，放進(jìn)工作臺(tái)。
6、把解剖刀、剪刀、鑷子等器械浸泡在95%的酒精中，再在火焰上消毒，放在器械架上。
7、在酒精燈火焰附近切割備用的接種材料。
8、打開瓶口，用火焰燒瓶口，轉(zhuǎn)動(dòng)瓶口使瓶口部分都燒到。
9、取下接種器械，在火焰上消毒。
10、把培養(yǎng)材料放入培養(yǎng)瓶，蓋上瓶口。
11、接種結(jié)束后，清理和關(guān)閉超凈工作臺(tái)。
注意：操作期間應(yīng)經(jīng)常用70%-75%的酒精擦拭工作臺(tái)和雙手，接種器械應(yīng)反復(fù)在95%的酒精中浸泡和在火焰上消毒。
以上設(shè)備清單僅供大家參考，具體配置需根據(jù)各位老師、使用者的實(shí)際需求策劃。希望今天的分享能對(duì)大家有所幫助。植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)認(rèn)準(zhǔn)華安，植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)經(jīng)驗(yàn)豐富，承接各類實(shí)驗(yàn)室裝修設(shè)計(jì)，歡迎來電咨詢~
