PCR實(shí)驗(yàn)室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析等三或四個(gè)區(qū)域。只是使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測(cè)定儀的PCR實(shí)驗(yàn)室,有上述前面三個(gè)區(qū)域即可。各區(qū)域應(yīng)完全獨(dú)立分隔,不應(yīng)有任何的空氣直通。
產(chǎn)物分析區(qū)或三個(gè)區(qū)域的最后一個(gè)區(qū)域(即擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)),空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi),可通過(guò)在室內(nèi)設(shè)置通風(fēng)櫥、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統(tǒng)達(dá)到空氣流由室外向室內(nèi)流動(dòng)的要求。
PCR實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域?qū)嶒?yàn)室設(shè)備配備通常如下:
1、試劑準(zhǔn)備區(qū):
儀器設(shè)備主要應(yīng)有加樣器、冰箱、天平、低速離心機(jī)、混勻器、可移動(dòng)紫外燈等??墒褂贸瑑艄ぷ髋_(tái)作為試劑配制操作臺(tái)面。
2、標(biāo)本制備區(qū)
儀器設(shè)備主要應(yīng)有生物安全柜(最好為B2, 可避免提取核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán),造成標(biāo)本間交叉“污染”,出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。此外還應(yīng)配備加樣器、臺(tái)式高速離心機(jī)(冷凍及常溫)、臺(tái)式低速離心機(jī)、恒溫設(shè)備(水浴和/或干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動(dòng)紫外燈等。
3、擴(kuò)增區(qū)
主要儀器就是核酸擴(kuò)增熱循環(huán)儀(PCR儀,實(shí)時(shí)熒光或普通的)。熱循環(huán)儀的電源應(yīng)專用,并配備一個(gè)穩(wěn)壓電源或UPS,以防止由于電壓的波動(dòng)對(duì)擴(kuò)增測(cè)定的影響。此外,根據(jù)工作需要,還可配備加樣器、超凈臺(tái)等。
4、產(chǎn)物分析區(qū):
本區(qū)所使用的儀器設(shè)備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測(cè)序儀、酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等。
在理想情況下,PCR實(shí)驗(yàn)室試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增三個(gè)區(qū)域可設(shè)置緩沖間。在緩沖間內(nèi),可設(shè)置正壓,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。
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