無(wú)菌室是微生物檢測(cè)的重要場(chǎng)所與基本的設(shè)施。它是微生物檢測(cè)質(zhì)量保證的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。因此它的設(shè)計(jì)要按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)-2001《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》、國(guó)家藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的《藥品檢驗(yàn)所實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范（試行）》中第十八條規(guī)定執(zhí)行。微生物實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌室的施工、安裝、驗(yàn)收應(yīng)按國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)JGJ71-1990《無(wú)菌室的施工及驗(yàn)收規(guī)范》執(zhí)行。對(duì)于微生物檢測(cè)工作者和使用管理者來(lái)講，更大量的工作是進(jìn)行正常管理到日常的使用。無(wú)菌室的標(biāo)準(zhǔn)要符合GMP潔凈度標(biāo)準(zhǔn)要求。
無(wú)菌室的要求標(biāo)準(zhǔn)
1.無(wú)菌室要符合規(guī)范要求：無(wú)菌室應(yīng)采光良好、避免潮濕、遠(yuǎn)離廁所及污染區(qū)。面積一般不超過(guò)10m2，不小于5m2；高度不超過(guò)2.4m。由1—2個(gè)緩沖間、操作間組成（操作間和緩沖間的門(mén)不應(yīng)直對(duì)），操作間和緩沖間之間應(yīng)具備滅菌功能的樣品傳遞箱。在緩沖間內(nèi)應(yīng)有洗手盆、毛巾、無(wú)菌衣褲放置架及掛鉤、拖鞋等，不應(yīng)放置培養(yǎng)箱和其他雜物；無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)六面光滑平整，能耐受清洗消毒。墻壁與地面、天花板連接處應(yīng)呈凹弧形，無(wú)縫隙，不留死角。操作間內(nèi)不應(yīng)安裝下水道。
無(wú)菌操作室應(yīng)具有空氣除菌過(guò)濾的單向流空氣裝置，操作區(qū)潔凈度100級(jí)或放置同等級(jí)別的超凈工作臺(tái)，室內(nèi)溫度控制18—26℃，相對(duì)濕度45%—65%。緩沖間及操作室內(nèi)均應(yīng)設(shè)置能達(dá)到空氣消毒效果的紫外燈或其他適宜的消毒裝置，空氣潔凈級(jí)別不同的相鄰房間之間的靜壓差應(yīng)大于5Pa，無(wú)菌室（區(qū)）與室外大氣的靜壓差大于10Pa。無(wú)菌室內(nèi)的照明燈應(yīng)嵌裝在天花板內(nèi)，室內(nèi)光照應(yīng)分布均勻，光照度不低于300lx。緩沖間和操作間所設(shè)置的紫外線殺菌燈（2—2.5w/m3），應(yīng)定期檢查輻射強(qiáng)度，要求在操作面上達(dá)40uw/m2。不符合要求的紫外殺菌燈應(yīng)及時(shí)更換。
2.建立使用登記制度：藥廠各個(gè)微生物檢測(cè)檢驗(yàn)室都要建立使用登記制度。在登記冊(cè)中可設(shè)置以下項(xiàng)目?jī)?nèi)容：如使用日期、時(shí)間、使用人、設(shè)備運(yùn)行狀況、溫度、濕度、潔凈度狀態(tài)（沉降菌數(shù)、浮游菌數(shù)、塵埃粒子數(shù)）、報(bào)修原因、報(bào)修結(jié)果、清潔工作（臺(tái)面、地面、墻面、天花板、傳遞窗、門(mén)把手）、消毒液名稱(chēng)等。
3.建立使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范（SOP）并嚴(yán)格管理:SOP內(nèi)容至少要有以下幾點(diǎn)：（1）規(guī)定凈化系統(tǒng)使運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間要求每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)開(kāi)啟凈化系統(tǒng)使運(yùn)轉(zhuǎn)至少1h以上，同時(shí)開(kāi)啟凈化臺(tái)和紫外燈。
（2）物品進(jìn)入無(wú)菌室基本要求：凡進(jìn)入無(wú)菌室的物品必須先在緩沖間內(nèi)對(duì)外部表面用消毒劑消毒滅菌，再經(jīng)物流緩沖間、傳遞窗1h以上，及無(wú)菌空氣吹干后送入無(wú)菌室。注意帶纖維、易發(fā)塵物品不得帶進(jìn)凈化實(shí)驗(yàn)室。無(wú)菌室內(nèi)固定物品不得任意搬出。
（3）人員進(jìn)入無(wú)菌室要求：實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入無(wú)菌室不得化妝、帶手表、戒指等首飾；不得吃東西、嚼口香糖。應(yīng)清潔手后進(jìn)入緩沖間更衣，同時(shí)換上消毒隔離拖鞋，脫去外衣，用消毒液消毒雙手后戴上無(wú)菌手套，換上無(wú)菌連衣帽（不得讓頭發(fā)、衣等暴露在外面），戴上無(wú)菌口罩。然后，換或是再戴上第二副無(wú)菌手套，在進(jìn)入第二緩沖間時(shí)換第二雙消毒隔離拖鞋。再經(jīng)風(fēng)淋室30s風(fēng)淋后進(jìn)入無(wú)菌室。
（4）溫濕度觀察要求：觀察溫度計(jì)、濕度計(jì)上顯示的溫濕度是否在規(guī)定的范圍內(nèi)，并作為實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄在案。如發(fā)現(xiàn)問(wèn)題應(yīng)及時(shí)尋找原因，及時(shí)報(bào)修和及時(shí)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主管，并將報(bào)修原因和結(jié)果記錄歸檔。
（5）沉降菌落計(jì)數(shù)與浮游菌測(cè)定要求：在每次實(shí)驗(yàn)同時(shí)，對(duì)操作室和層流臺(tái)做微生物沉降菌落計(jì)數(shù)，將結(jié)果記錄在使用登記本上，并作為實(shí)驗(yàn)環(huán)境原始數(shù)據(jù)記錄在實(shí)驗(yàn)報(bào)告上。每周1次，或在無(wú)菌檢查等必要時(shí)，在每次實(shí)驗(yàn)同時(shí)對(duì)操作室和凈化臺(tái)進(jìn)行浮游菌測(cè)定，將結(jié)果記錄在使用登記本上，并作為實(shí)驗(yàn)環(huán)境原始數(shù)據(jù)記錄在實(shí)驗(yàn)報(bào)告上。
（6）消毒要求：無(wú)菌室每周和每次操作前用0.1%新潔爾滅或2%甲酚液或其他適宜消毒液（常用消毒劑的品種有：5—20倍稀釋的碘伏水溶液、0.1%新潔爾滅溶液、1：50的84消毒液、75%乙醇溶液、3%碘酒溶液、5%石炭酸（來(lái)蘇兒）消毒溶液、2%戊二醛水溶液、尼泊金乙醇消毒液（處方：對(duì)羥基苯甲酸甲酯21.5g；對(duì)羥基苯甲酸丙酯8.6g，75%乙醇10ml）等，所用的消毒劑品種與使用要進(jìn)行有效性驗(yàn)證方可使用，并定期更換消毒劑的品種）擦拭操作臺(tái)及可能污染的死角，方法是用無(wú)菌紗布浸漬消毒溶液清潔超凈臺(tái)的整個(gè)內(nèi)表面、頂面、及無(wú)菌室、人流、物流、緩沖間的地板、傳遞窗、門(mén)把手。清潔消毒程序應(yīng)從內(nèi)向外，從高潔凈區(qū)到低潔凈區(qū)。逐步向外退出潔凈區(qū)域。然后開(kāi)啟無(wú)菌空氣過(guò)濾器及紫外燈殺菌1—2h，以殺滅存留微生物。在每次操作完畢，同樣用上述消毒溶液擦拭工作臺(tái)面，除去室內(nèi)濕氣，用紫外燈殺菌30min。
（7）其他要求：如遇停電，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)，離開(kāi)無(wú)菌室。關(guān)閉所有電閘。重新進(jìn)入無(wú)菌室前至少開(kāi)啟機(jī)房運(yùn)轉(zhuǎn)1h以上。
4.潔凈度檢查的要求與方法：無(wú)菌室在消毒處理后，無(wú)菌試驗(yàn)前及操作過(guò)程中需檢查空氣中菌落數(shù)，以此來(lái)判斷無(wú)菌室是否達(dá)到規(guī)定的潔凈度，常有沉降菌和浮游菌測(cè)定方法。
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